بیشتر مستعد خرابی ها و راه حل های HPLC هستند

HPLC به عنوان یک ابزار با دقت بالا، اگر در حین استفاده به درستی کار نکند، به راحتی می تواند منجر به برخی مشکلات کوچک دردسرساز شود.یکی از رایج ترین مشکلات، مشکل فشرده سازی ستون است.نحوه عیب یابی سریع کروماتوگراف معیوبسیستم HPLC عمدتاً از یک بطری مخزن، یک پمپ، یک انژکتور، یک ستون، یک محفظه دمای ستون، یک آشکارساز و یک سیستم پردازش داده تشکیل شده است.برای کل سیستم، ستون ها، پمپ ها و آشکارسازها اجزای کلیدی و مکان های اصلی هستند که مستعد مشکلات هستند.

کلید فشار ستون ناحیه ای است که هنگام استفاده از HPLC نیاز به توجه دقیق دارد.پایداری فشار ستون ارتباط نزدیکی با شکل پیک کروماتوگرافی، راندمان ستون، راندمان جداسازی و زمان ماند دارد.پایداری فشار ستون به این معنی نیست که مقدار فشار در یک مقدار پایدار ثابت است، بلکه به این معنی است که محدوده نوسان فشار بین 345 کیلو پاسکال یا 50 PSI است (که امکان استفاده از شستشوی گرادیان را در زمانی که فشار ستون پایدار است و به آرامی تغییر می‌کند) است.فشار خیلی زیاد یا خیلی کم یک مشکل فشار ستون است.

بیشتر مستعد خرابی ها و راه حل های HPLC هستند

1، فشار بالا رایج ترین مشکل در استفاده از HPLC است.این به معنای افزایش ناگهانی فشار است.به طور کلی، دلایل زیر وجود دارد: (1) به طور کلی، این به دلیل انسداد کانال جریان است.در این مرحله باید آن را به صورت تکه ای بررسی کنیم.آ.ابتدا ورودی پمپ وکیوم را قطع کنید.در این مرحله، لوله PEEK با مایع پر شد به طوری که لوله PEEK کوچکتر از بطری حلال بود تا ببیند آیا مایع به میل خود چکه می کند یا خیر.اگر مایع چکه نکند یا به آرامی چکه کند، سر فیلتر حلال مسدود می شود.درمان: به مدت نیم ساعت در اسید نیتریک 30 درصد خیسانده و با آب فوق خالص شستشو دهید.اگر مایع به طور تصادفی چکه کند، سر فیلتر حلال طبیعی است و در حال بررسی است.بشیر Purge را باز کنید تا فاز متحرک از ستون عبور نکند و اگر فشار به میزان قابل توجهی کاهش پیدا نکرد، سر سفید فیلتر مسدود می شود.درمان: جوش‌های سرسفید فیلتر شده برداشته شدند و با ایزوپروپانول 10 درصد به مدت نیم ساعت سونیک شدند.با فرض کاهش فشار به زیر 100PSI، سر سفید فیلتر شده طبیعی است و در حال بررسی است.جانتهای خروجی ستون را بردارید، اگر فشار کاهش نیابد، ستون مسدود می شود.درمان: اگر انسداد نمک بافر است، 95% شستشو دهید تا فشار نرمال شود.اگر انسداد ناشی از موادی است که به شدت حفظ شده است، باید از جریان قوی‌تری نسبت به فاز متحرک فعلی برای هجوم به سمت فشار عادی استفاده کرد.اگر فشار نظافت طولانی مدت طبق روش فوق کاهش پیدا نکند می توان ورودی و خروجی ستون را برعکس به دستگاه متصل دانست و ستون را با فاز متحرک تمیز کرد.در این زمان اگر باز هم فشار ستون کاهش نیافته باشد، صفحه غربال ورودی ستون فقط قابل تعویض است، اما زمانی که عملکرد خوب نباشد، به راحتی منجر به کاهش اثر ستون می شود، بنابراین سعی کنید کمتر استفاده کنید.برای مشکلات دشوار، جایگزینی ستون ممکن است در نظر گرفته شود.

(2) تنظیم نرخ جریان نادرست: نرخ جریان صحیح را می توان بازنشانی کرد.

(3) نسبت جریان نادرست: شاخص ویسکوزیته نسبت های مختلف جریان ها متفاوت است و فشار سیستم متناظر جریان با ویسکوزیته بالاتر نیز بزرگتر است.در صورت امکان می توان حلال های با ویسکوزیته کمتر را جایگزین کرد یا دوباره تنظیم و آماده کرد.

(4) رانش فشار صفر سیستم: صفر سنسور سطح مایع را تنظیم کنید.

2، فشار خیلی کم است (1) معمولاً ناشی از نشت سیستم است.چه باید کرد: هر اتصال، به خصوص رابط را در هر دو انتهای ستون پیدا کنید، و ناحیه نشتی را محکم کنید.پایه را بردارید و فیلم PTFE را با نیروی مناسب سفت یا خط بکشید.

(2) گاز وارد پمپ می شود، اما فشار معمولاً در این زمان ناپایدار، زیاد و کم است.به طور جدی تر، پمپ قادر به جذب سیال نخواهد بود.روش درمان: شیر تمیز کردن را باز کنید و با سرعت جریان 3 تا 5 میلی لیتر در دقیقه تمیز کنید.در غیر این صورت، حباب‌های هوا با استفاده از یک لوله سوزن اختصاصی در دریچه خروجی تنفس می‌شوند.

(3) عدم خروج فاز متحرک: بررسی کنید که آیا یک فاز متحرک در بطری مخزن وجود دارد، آیا سینک در فاز متحرک غوطه ور شده است یا خیر، و آیا پمپ در حال کار است.

(4) شیر مرجع بسته نیست: شیر مرجع پس از کاهش سرعت بسته می شود.معمولاً تا 0.1 پایین می آید.~ 0.2 میلی لیتر در دقیقه پس از بستن شیر مرجع.

خلاصه:

در این مقاله تنها مشکلات رایج در کروماتوگرافی مایع مورد تجزیه و تحلیل قرار می گیرند.البته در کاربرد عملی خود با مشکلات دیگری نیز مواجه خواهیم شد.در رسیدگی به خطا، باید اصول زیر را رعایت کنیم: فقط یک عامل را در هر زمان تغییر دهید تا رابطه بین عامل فرضی و مشکل مشخص شود.به طور کلی، هنگام تعویض قطعات برای عیب یابی، باید توجه داشته باشیم که قطعات دست نخورده جدا شده را دوباره در جای خود قرار دهیم تا از هدر رفتن جلوگیری شود.ایجاد یک عادت خوب رکورد کلید موفقیت در رسیدگی به خطا است.در خاتمه، در هنگام استفاده از HPLC، توجه به پیش تصفیه نمونه و بهره برداری و نگهداری مناسب تجهیزات حائز اهمیت است.