آنتی ژن های پروتئین نوترکیب اغلب دارای چندین اپی توپ مختلف هستند که برخی از آنها اپی توپ های توالی و برخی اپی توپ های ساختاری هستند.آنتی بادی های پلی کلونال به دست آمده از ایمن سازی حیوانات با آنتی ژن های دناتوره شده مخلوطی از آنتی بادی های خاص برای اپی توپ های منفرد هستند و می توانند به طور کلی برای شناسایی ساختارهای طبیعی یا پروتئین های هدف دناتوره شده استفاده شوند.یک مزیت جانبی استفاده از پروتئین های دناتوره شده به عنوان ایمونوژن این است که پروتئین های دناتوره شده بیشتر ایمنی زا هستند و می توانند پاسخ ایمنی قوی را در حیوانات تحریک کنند.
سیستم بیان اشرشیاکلی معمولاً برای اهداف آنتی ژنی انتخاب می شود زیرا از نظر زمان و هزینه پرهزینه ترین سیستم است.به منظور بهبود امکان بیان پروتئین هدف و راحتی خالص سازی، گاهی اوقات تنها یک قطعه کوچک از پروتئین هدف، مانند یک دامنه خاص، بیان می شود.
ساختار سه بعدی پروتئین ها
دامنه خاص یک پروتئین
اگر هدف از آماده سازی آنتی بادی صرفاً برای تشخیص wb باشد، استفاده از پپتید کوچک مصنوعی به عنوان آنتی ژن مقرون به صرفه و سریع است، اما به دلیل انتخاب نامناسب بخش پپتیدی، خطر ایمنی زایی ضعیف یا عدم بازسازی مجدد وجود دارد.از آنجایی که آماده سازی آنتی بادی به یک دوره طولانی نیاز دارد، دو یا سه بخش مختلف پپتیدی اغلب برای تهیه آنتی بادی با استفاده از آنتی ژن پلی پپتیدی برای اطمینان از میزان موفقیت آزمایش انتخاب می شوند.
خلوص آنتی ژن پلی پپتیدی برای ایمن سازی باید بیشتر از 80 درصد باشد.اگرچه خلوص بالاتر از نظر تئوری می تواند آنتی بادی هایی با ویژگی بهتر به دست آورد، در عمل، حیوانات همیشه تعداد زیادی آنتی بادی غیر اختصاصی تولید می کنند، بنابراین مزایای خلوص آنتی ژن را پنهان می کنند.
علاوه بر این، تهیه آنتی بادی از پپتیدهای کوچک باید به آنتی ژن حامل مناسب متصل شود تا ایمنی زایی آن افزایش یابد.دو ناقل رایج آنتی ژنی KLH و BSA هستند.
زمان ارسال: مارس-23-2023